對于單細胞懸液的制備和其單細胞的測序,通常我們都會選擇應用專用的單細胞懸液制備儀來進行樣品細胞的實驗操作。
單細胞制備儀是一種集成金屬浴消化與溫和剪切組織的新一代細胞懸液制備設備,應用于流式細胞術/單細胞測序/原代細胞培養(yǎng)等實驗,具有起始組織量小,時間短,細胞得率高,細胞活性高的特點。采用國際DIN方法設計,低噪音,使用方便,性能穩(wěn)定,帶加熱功能,對樣品的消化處理過程始終處在恒溫狀態(tài)。
此次應用單細胞制備儀的實驗目的就在于對小鼠的動物組織肝、腎、脾單細的胞懸液制備,同時在實驗前還需準備一些相配適用的研磨套裝管、濾管、移液槍、培養(yǎng)皿、鑷子、手術刀、PBS液、凈信消化酶、終止液等器具耗材試劑的應用。
制備單細胞懸液的操作步驟:
1、開機預熱,打開加熱模塊1,加熱模塊2
2、取活體組織后,放入PBS液中去紅,然后取樣品
3、把消化酶用移液器加入研磨套裝管中,將加滿消化酶的離心管放入預熱模塊中預熱若干分鐘
4、將處理好的組織用鑷子轉(zhuǎn)移到加滿消化酶的離心管中
5、將裝滿消化酶和組織的離心管放置到加熱板中,選擇25分鐘程序,開始運行
6、程序結束取出離心管,將消化好的組織液轉(zhuǎn)移到過濾管中,即得到一管單細胞懸液
肝臟組織
脾臟組織
腎臟組織
應用單細胞懸液制備儀不但對樣品組織的利用率高、單細胞產(chǎn)出高,且單細胞化過程高效。在針對組織單細胞測序時,可快速完成單細胞化處理,獲得高產(chǎn)且活率在85%以上的單細胞;在針對臨床穿刺樣本,可使組織的利用率達到百分之100,細胞產(chǎn)量可達10萬個以上v;在針對不同的樣本選擇不同的程序(6組預設程序),處理樣品量可達4*2ml/6*2ml/8*2ml;在針對原細胞培養(yǎng)樣本時,可在15min內(nèi)完成組織到單細胞過程,降低細胞逆境時間,提高細胞存活率。